這個軟骨藻酸（ASP）ELISA檢測方法可以很敏感的定量檢測軟骨藻酸的含量。軟骨藻酸是和健忘性貝類毒素相關(guān)的一類海藻產(chǎn)生的水溶性毒素。試劑盒用于定量或定性檢測檢測水樣和貝類樣品中軟骨藻酸的含量。貝類樣品需要進行樣品前處理。如果需要可以用傳統(tǒng)的方法例如HPLC,GC/MS來證實。
2．安全說明
試劑盒中的標準溶液里含有少量的軟骨藻酸。底物中包含有四甲基聯(lián)苯胺，終止液中含有稀硫酸。要避免皮膚和粘膜與終止液接觸，如果不小心接觸了請馬上用水沖洗。
3．保存和穩(wěn)定性
試劑盒應(yīng)保存在2-8℃，不要冷凍。在使用之前要把試劑盒中的溶液回復(fù)到室溫（20-25℃）。有效期內(nèi)試劑盒中的試劑都可以使用。
4．原理
試劑盒的原理是直接競爭ELISA法，通過特異性抗體來識別軟骨藻酸。當樣品中含有軟骨藻酸時，樣品中的軟骨藻酸與軟骨藻酸酶結(jié)合物競爭結(jié)合溶液中的軟骨藻酸抗體。軟骨藻酸抗體與包被在微孔板上的羊抗鼠二抗結(jié)合。經(jīng)過一步洗滌加入底物溶液，產(chǎn)生有色反應(yīng)。產(chǎn)生的綠色的顏色深度與樣品中軟骨藻酸的含量成反比。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。用酶標儀在450nm處測定吸光度值。通過繪制標準曲線來計算樣品中軟骨藻酸的含量。
5. 軟骨藻酸試劑盒的局限性和可能的干擾
對在水樣中經(jīng)常出現(xiàn)的多種有機物和無機物已近作過檢測對此試劑盒并無干擾。由于化合物的易變質(zhì)性由基質(zhì)反應(yīng)引起的干擾是不可能完全避免的。操作不當也可能導(dǎo)致檢測結(jié)果錯誤，比如：試劑盒保存條件不對、錯誤的加液順序、試劑的量沒有加準確、孵育的時間太長或太短、孵育的溫度太高或太低。與其它檢測方法一樣對陽性結(jié)果要求通過其它傳統(tǒng)的方法來驗證。
6．軟骨藻酸測定的重要性
軟骨藻酸及其衍生物是一類海藻產(chǎn)生的水溶性毒素，主要是大亞灣擬菱形藻等微藻類生物。大亞灣擬菱形藻水華會導(dǎo)致貝類等濾食性生物體內(nèi)軟骨藻酸的富集。ASP可以引起劑量依賴型的腹瀉、惡心、嘔吐癥狀。FDA對ASP的限量是20ppm。歐洲是20mgDA/kg。這個試劑盒可以檢測40個樣品（做兩個重復(fù)）。需要少量的樣品，檢測時間少于2小時。
